3M Allergen Protein ELISA Kit Handleiding

Type
Handleiding
(Nederlands)
NL
1
Datum van uitgifte: 2017-11
Productinstructies
Kokos Proteïne ELISA test
Enzymgekoppeld immunosorbent-assay (ELISA) voor de kwantitatieve analyse van kokosproteïne.
Productbeschrijving en beoogd gebruik
De 3M™ Kokos Proteïne ELISA test is bedoeld voor de detectie van kokosproteïne in CIP-water ('clean-in-place') van de
laatste spoeling, omgevingsmonsters, voedingsingrediënten en verwerkte voedingsmiddelen.
De 3M Kokos Proteïne ELISA test maakt gebruik van een sandwich-ELISA. De aanwezige kokosproteïne in het
monster reageert met het anti-kokos antilichaam, dat geadsorbeerd is aan het oppervlak van wells in een polystyreen
microtiterplaat. Nadat ongebonden proteïne is verwijderd door middel van wassen, worden anti-kokos antilichamen
geconjugeerd met mierikswortelperoxidase (HRP – 'horseradish peroxidase') toegevoegd. Deze met enzymen
gelabelde antilichamen vormen complexen met de eerder gebonden kokosproteïne. Na een tweede wasstap wordt het
enzym dat is gebonden aan het immunosorbent gedetecteerd door middel van het toevoegen van een chromogene
substraat, 3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine (TMB). De kleurontwikkeling van deze enzymatische reactie staat in direct
verband met de concentratie van kokosproteïne in het geteste monster; daarom is de absorptie, bij 450nm, een
meting voor de concentratie van kokosproteïne in het testmonster. De kwantiteit van kokosproteïne in het testmonster
kan geëxtrapoleerd worden van de standaardcurve die is samengesteld met behulp van standaarden van bekende
concentraties en is aangepast aan de verdunning van het monster.
De 3M Kokos Proteïne ELISA test is bedoeld voor gebruik in een laboratoriumomgeving door professionals
geschoold in laboratoriumtechnieken. 3M heeft het gebruik van dit product niet gedocumenteerd in andere sectoren
dan de voedings- of dranksector. 3M heeft dit product bijvoorbeeld niet gedocumenteerd voor farmaceutische,
cosmetische, klinische of veterinaire monsters. De 3M Kokos Proteïne ELISA test is niet getest met alle voorkomende
voedingsproducten, voedingsprocessen en testprotocollen.
De 3M Kokos Proteïne ELISA test bevat 96 wells, die zijn beschreven in Tabel 1.
Tabel 1. Setonderdelen
Artikel Identicatie Voorbereiding
(raadpleeg
het onderdeel
'De reagentia
voorbereiden' voor
details)
Opslag Stabiliteit
3M™ Kokos Proteïne
ELISA wells
Een foliezakje met
een plaat van 96
verwijderbare wells
gecoat met antilichaam.
Klaar voor gebruik. 2-8°C in
verzegelde foliezak
met droogmiddel.
Hersluit de foliezak
met de ongebruikte
wells en droogmiddel.
Bewaar de set
bij 2-8°C om de
stabiliteit te behouden
tot de vervaldatum.
3M™ Kokos HRP-
conjugaat (10X)
Een ampul met 1,5ml
met 10X antilichamen
geconjugeerd met HRP
(mierikswortelperoxidase)
(10X).
Verdun voorafgaand
aan gebruik
onmiddellijk 1/10 om
een 1X werkzame
oplossing te maken.
2-8°C in het
donker.
Het 10X conjugaat
is stabiel tot de
vervaldatum van de
set.
3M™ Kokos Proteïne
Standaardconcentraat
Een ampul met
kokosproteïne waarvan
de concentratie bekend
is.
Raadpleeg het
onderdeel 'ELISA-
procedure' voor
de standaard
voorbereiding.
2-8 °C. Niet
invriezen.
3M Kokos Proteïne
Standaardconcentraat
is stabiel tot de
vervaldatum van
de set.
3
(Nederlands)
NL
2
3M™
Verdunningsmiddel
(5X)
Eén esje van 50 ml met
5X verdunningsmiddel.
Verdun voorafgaand
aan gebruik
onmiddellijk 1/5 om
een 1X werkzame
oplossing te maken.
2-8 °C De 5X 3M
Verdunningsoplossing
is stabiel tot de
vervaldatum van de
set.
3M™ Wasoplossing
(20X)
Eén esje van 50 ml met
20X wasoplossing.
Verdun 1/20 om
een 1X werkzame
oplossing te maken.
2-8°C voor zowel
1X werkzame
oplossing als 20X
wasoplossingscon-
centraat.
De 20X 3M
Wasoplossing
is stabiel tot de
vervaldatum van
de set. De 1X
wasoplossing is na
bereiding minimaal
een week stabiel.
3M™ Extractiebuer
E26 (4X)
Eén esje van 120 ml met
4X extractiebuer.
Verdun 1/4 om
een 1X werkzame
oplossing te maken.
De werkzame
oplossing moet
voorafgaand aan
gebruik worden
verhit tot 50-60°C.
2-8°C voor 1X
werkzame oploss-
ing en 4X 3M
Extractiebuer-
concentraat.
De 1X extractiebuer
en 4X 3M
Extractiebuer
zijn stabiel tot de
vervaldatum van de
set.
3M™ Chromogene
substraatoplossing
Eén esje van 12 ml met
3,3’,5,5’-
tetramethylbenzidine
(TMB).
Klaar voor gebruik. 2-8°C in het
donker.
Bescherm tegen licht.
De 3M Chromogene
substraatoplossing
is stabiel tot de
vervaldatum van de
set.
3M™ Stopoplossing Eén esje van 12 ml met
0,3 M zwavelzuur.
Klaar voor gebruik. 2-8 °C De 3M Stopoplossing
is stabiel tot de
vervaldatum van de
set.
Materialen die niet in de set worden geleverd:
precisiepipetten en pipettips om 10 tot 100l te verzamelen
• testbuisjes
was-/aspiratiemachine voor de microtiterplaat
gedestilleerd of gedeïoniseerd water
aezer voor de microtiterplaat
diverse laboratoriumproducten voor de bereiding van reagentia en bueroplossingen
• timer
• vortexmenger
schudwaterbad of schudincubator
orbitale schudmachine
Veiligheid
De gebruiker dient alle veiligheidsinformatie in de instructies voor de 3M Kokos Proteïne ELISA test te lezen, te
begrijpen en op te volgen. Bewaar de veiligheidsinstructies om deze later te kunnen raadplegen.
WAARSCHUWING: geeft een gevaarlijke situatie aan die, indien deze niet wordt vermeden, de dood, ernstig letsel
en/of materiële schade tot gevolg kan hebben.
OPMERKING: geeft een mogelijk gevaarlijke situatie aan die, als ze niet vermeden wordt, kan resulteren in
materiële schade.
(Nederlands)
NL
3
W WAARSCHUWING
Om de risico's van blootstelling aan chemicaliën te verminderen:
Afvoeren volgens de huidige plaatselijke/regionale/nationale/industriële standaarden en regelgevingen.
De gebruiker moet zijn personeel scholen in de huidige juiste testtechnieken; bijvoorbeeld, Goede
laboratoriumpraktijken
1
of ISO/IEC 17025
2
.
Volg altijd de standaard veiligheidsvoorschriften voor laboratoria op, waaronder het dragen van toepasselijke
beschermende kleding en oogbescherming bij het hanteren van reagentia.
Vermijd contact van de huid met de 3M Stopoplossing, raadpleeg het veiligheidsinformatieblad voor aanvullende
informatie.
Om de risico's te beperken die verbonden zijn aan foutieve negatieve resultaten die kunnen leiden tot de vrijgave
van besmet product:
Bewaar de 3M Kokos Proteïne ELISA test zoals aangegeven wordt op de verpakking en in de productinstructies.
Gebruik de 3M Kokos Proteïne ELISA test voor voedings- en omgevingsmonsters die intern of door een derde partij
zijn gevalideerd.
Volg het protocol en voer de testen exact uit zoals aangegeven in de productinstructies.
3M heeft het gebruik van de 3M Kokos Proteïne ELISA test niet gedocumenteerd in andere sectoren dan de
voedings- en drankensector. 3M heeft dit product bijvoorbeeld niet gedocumenteerd voor farmaceutische,
cosmetische, klinische of veterinaire monsters.
Om de risico’s van onjuiste resultaten die tot de vrijlating van besmet product leiden te verminderen, doet u het
volgende:
Gebruik de 3M Kokos Proteïne ELISA test altijd vóór de vervaldatum.
Bereid de werkzame oplossingen met behulp van de geconcentreerde reagentia van de 3M Kokos Proteïne ELISA
test altijd bij een temperatuur van 20-25°C.
Vries het 3M Kokos Proteïne Standaardconcentraat niet in.
Gebruik de chromogene substraatoplossing niet als deze blauw kleurt. Volg de Goede laboratoriumpraktijken
1
om
kruisbesmetting van de 3M Chromogene substraatoplossing te voorkomen.
OPMERKING
Beperk de risico's van onjuiste resultaten op de volgende wijze:
De stabiliteit van de monsters na extractie is niet geëvalueerd. De ELISA-procedure moet direct na extractie van
het monster worden uitgevoerd.
Hanteer de 3M Kokos Proteïne Standaarden volgens Goede laboratoriumpraktijken
1
om kruisbesmetting van
monsters te voorkomen.
Raadpleeg het veiligheidsinformatieblad voor aanvullende informatie.
Voor informatie over documentatie van productprestaties kunt u onze website op www.3M.com/foodsafety bezoeken
of contact opnemen met uw plaatselijke 3M-vertegenwoordiger of -distributeur.
Verantwoordelijkheid van de gebruiker
Gebruikers worden geacht zich vertrouwd te maken met de productinstructies en -informatie. Bezoek onze website
www.3M.com/foodsafety of neem contact op met uw plaatselijke 3M-vertegenwoordiger of -distributeur voor meer
informatie.
Zoals met alle testmethodes die worden gebruikt voor voedselanalyse, kan de testmatrix invloed hebben op
de resultaten. Bij het kiezen van een testmethode is het belangrijk om te erkennen dat externe factoren zoals
proefmethoden, testprotocollen, proefvoorbereiding en -behandeling en laboratoriumtechniek invloed kunnen hebben
op de resultaten. Het voedselmonster kan de resultaten beïnvloeden.
Het is de verantwoordelijkheid van de gebruiker dat hij/zij voldoende monsters beoordeelt om zich ervan te verzekeren
dat de gekozen testmethode voldoet aan de criteria van de gebruiker.
Het is ook de verantwoordelijkheid van de gebruiker om te bepalen of testmethoden en resultaten aan de vereisten van
klanten en leveranciers voldoen.
Zoals bij elke testmethode, garanderen de verkregen resultaten van het gebruik van een 3M Food Safety-product de
kwaliteit van de geteste matrices of processen niet.
(Nederlands)
NL
4
Garantiebeperkingen/Beperkte Oplossing
BEHALVE WAAR UITDRUKKELIJK VERMELD IN EEN BEPERKTE GARANTIEBEPALING VAN EEN INDIVIDUELE
PRODUCTVERPAKKING, WIJST 3M ALLE UITDRUKKELIJKE EN IMPLICIETE GARANTIES AF, MET INBEGRIP VAN,
MAAR NIET BEPERKT TOT, ELKE GARANTIE MET BETREKKING TOT DE GOEDE WERKING EN DE GESCHIKTHEID
VOOR EEN BEPAALD DOEL. Als een 3M Voedselveiligheidproduct gebrekkig is, zal 3M of zijn gevolmachtigde
distributeur naar eigen keuze het product vervangen of de aankoopprijs van het product terugbetalen. Dit is het enige
rechtsmiddel waarover u beschikt. Indien u vermoedt dat een product gebrekkig is, dan moet u 3M daarvan binnen
de 60 dagen na het vaststellen op de hoogte brengen. Bel onze klantenservice (+31-71-5450386) of uw erkende
vertegenwoordiger voor 3M Voedselveiligheid, die u autorisatie voor het retourneren van de goederen zal geven.
Beperking van 3M-aansprakelijkheid
3M IS NIET AANSPRAKELIJK VOOR ENIG VERLIES OF SCHADE, ONGEACHT OF HET GAAT OM RECHTSTREEKSE,
ONRECHTSTREEKSE, SPECIALE, INCIDENTELE OF GEVOLGSCHADE, MET INBEGRIP VAN, MAAR NIET BEPERKT
TOT WINSTDERVING. In geen geval zal de wettelijke aansprakelijkheid van 3M onder om het even welke juridische
theorie de aankoopprijs van het zogenaamd gebrekkige product overschrijden.
Opslag en afvalverwerking
Bewaar de inhoud van de 3M Kokos Proteïne ELISA test bij 2-8°C. Niet invriezen. Bewaar verdunde werkzame
oplossingen zoals beschreven in Tabel 1.
De onderdelen van de 3M Kokos Proteïne ELISA test mogen niet worden gebruikt na de vervaldatum. De vervaldatum en
het partijnummer zijn terug te vinden op het etiket aan de buitenzijde van de doos.
Afvoeren volgens de huidige plaatselijke/regionale/nationale/industriële standaarden en regelgevingen.
Gebruiksaanwijzingen
Volg alle instructies zorgvuldig op. Het niet opvolgen van de instructies kan onnauwkeurige resultaten tot gevolg hebben.
De reagentia voorbereiden
Laat alle reagentia voorafgaand aan gebruik op omgevingstemperatuur komen (20-25°C). Gebruik schone
laboratoriumproducten om werkzame oplossingen te verdunnen en te bewaren.
a. 3M Extractiebuer
Om de 1X extractiebuer te bereiden, voegt u één deel van de 3M Extractiebuer (4X) toe aan drie delen
gedeïoniseerd of gedestilleerd water om te verdunnen. Verwarm voorafgaand aan gebruik de extractiebuer (1X)
voor tot 50-60°C in een waterbad of schudincubator. Elk monster vereist 4,5 ml van de 1X extractiebuer.
b. 3M Verdunningsoplossing
Om de 1X verdunningsoplossing te bereiden, voegt u één deel van het 3M Verdunningsmiddel (5X) toe aan vier
delen gedeïoniseerd of gedestilleerd water. Elk monster vereist in totaal 4,5 ml van het 1X verdunningsmiddel.
c. 3M Wasoplossing
Om de 1X wasoplossing te bereiden, voegt u één deel van het 3M Wasoplossing (20X) toe aan 19 delen
gedeïoniseerd of gedestilleerd water. Elke 3M ELISA well vereist ongeveer 2,5 ml 1X wasoplossing.
Opmerking: Wanneer de 3M Wasoplossing (20X) wordt opgeslagen bij 2-8°C is het mogelijk dat zich kristallen
vormen in de oplossing. Om kristallen op te lossen verwarmt u de 3M Wasoplossing (20X) tot 30-35°C in een
waterbad of incubator voorafgaand aan de bereiding van de wasoplossing (1X).
d. 3M Kokos HRP-conjugaat
Om het 1X kokos HRP-conjugaat te bereiden, voegt u één deel van het 3M Kokos HRP-conjugaat (10X) toe aan
9 delen van de 1X verdunningsoplossing. Bereid deze oplossing onmiddellijk voor gebruik. Elke 3M ELISA well
vereist 100 l van het 1X kokos HRP-conjugaat.
Voorbereiding monster
Opmerking: Alle monsters moeten worden geëxtraheerd met 1X extractiebuer voorverwarmd tot 50-60°C.
1.1 Bereid het monster voor proteïne-extractie in een schoon testbuisje of wegwerpbuisje zoals beschreven in Tabel 2.
(Nederlands)
NL
5
Tabel 2. Voorbereiding monster
Monstermatrix Monstergrootte Verdunning (1/10)
Vaste voedingsmiddelen 0,5 ± 0,02g Voeg 4,5 ± 0,09ml voorverwarmde 1X extractiebuer
toe
Vloeibare voedingsmiddelen 0,5 ± 0,01ml Voeg 4,5 ± 0,09ml voorverwarmde 1X extractiebuer
toe
CIP-water ('clean-in-place') van de
laatste spoeling
0,5 ± 0,01ml Voeg 4,5 ± 0,09ml voorverwarmde 1X extractiebuer
toe
Vaste stof
Vloeistof
1.2 Incubeer de monsters 25 ± 1 minuut lang in een schudwaterbad of schudincubator bij 50-60°C. Een andere optie is
de monsters in een waterbad of incubator van 50-60°C plaatsen en elke 5 minuten gedurende 1 minuut handmatig
schudden.
1.3 Centrifugeer de monsters 20 tot 30 seconden bij 5000-7000 rpm (3000 x g) na incubatie om deeltjes te
pelletiseren of laat de monsters 5 minuten in een testbuisrek bezinken.
1.4 Verzamel 100l vanuit de middelste (waterige) laag en voeg dit toe aan 900l verdunningsoplossing (1X).
Meng de oplossing goed door middel van schudden of mengen in de vortexmenger. (Dit correspondeert met een
1/100 verdunning van het originele monster.)
of
50-60 °C
00:25:00
(Nederlands)
NL
6
of
3000 g / 00:00:30
00:05:00
ELISA-procedure
2.1 Verwijder één 3M ELISA well per monster en/of standaard en plaats de wells in de daarvoor geschikte houder.
Plaats de ongebruikte 3M ELISA wells terug in de foliezak, hersluit de zak en plaats deze terug in opslag bij 2-8°C.
2.2 Bereid met behulp van het 3M Kokos Proteïne Standaardconcentraat een set van vier standaarden verdund in
verdunningsoplossing (1X).
Nummer
standaard
Concentratie standaard
(ng/ml)
Volume van standaard
toegevoegd aan 1X
verdunningsmiddel
Volume van 1X
verdunningsoplossing
4 540 10 l 3M Kokos Proteïne
Standaardconcentraat
990 l
3 180 200 l van standaard nummer 4 400 l
2 60 200 l van standaard nummer 3 400 l
1 20 200 l van standaard nummer 2 400 l
0 0 0 400 l
2.3 Pipetteer 100 l van elke standaard in 3M ELISA wells.
Standaard 0 (1X Verdunningsoplossing)
Standaard 1 (20 ng/ml) ppb
Standaard 2 (60 ng/ml) ppb
Standaard 3 (180 ng/ml) ppb
Standaard 4 (540 ng/ml) ppb
2.4 Pipetteer 100l van het monster dat is geëxtraheerd in stap 1.4 in een 3M ELISA well.
2.5 Incubeer 3M ELISA wells 30 ± 2 minuten in een orbitale schudmachine ingesteld op 400 rpm op
omgevingstemperatuur (20-25°C). Voorkom verdamping door de wells afgedekt en horizontaal te houden tijdens
deze stap.
2.6 Aspireer de inhoud van de 3M ELISA wells na de incubatie.
2.7 Vul elke 3M ELISA well volledig met 1X wasoplossing en aspireer deze daarna. Indien het wassen handmatig
wordt uitgevoerd, draai de plaat om en giet/schud de inhoud leeg in een afvalcontainer. Sla de wells krachtig
op absorberend papier om resterende wasoplossing te verwijderen. Herhaal deze stap drie keer om in totaal vier
wasbeurten te voltooien.
2.8 Pipetteer 100 l 1X Kokos HRP-conjugaat in elke 3M ELISA well. Incubeer 10 ± 2 minuten in een orbitale
schudmachine ingesteld op 400 rpm op omgevingstemperatuur. Houd de plaat tijdens deze stap afgedekt in het
donker en horizontaal.
2.9 Herhaal stappen 2.6 en 2.7 om in totaal vier wasbeurten te voltooien met wasoplossing (1X).
2.10 Pipetteer 100 l 3M Chromogene substraatoplossing (TMB) in elke 3M ELISA well.
2.11 Incubeer 10 minuten in een orbitale schudmachine ingesteld op 400 rpm op omgevingstemperatuur. Houd de plaat
tijdens deze stap afgedekt in het donker en horizontaal.
2.12 Voeg na de incubatie 100 l 3M Stopoplossing toe aan elke 3M ELISA well en bepaal de absorptie (bij 450 nm)
binnen 30 minuten.
(Nederlands)
NL
7
00:30:00/omgevingstemperatuur
00:10:00/omgevingstemperatuur
00:10:00/omgevingstemperatuur
Resultatenanalyse
3.1 Trek de gemiddelde achtergrondwaarde van elk monster af (de gemiddelde gemeten absorptie van het monster
minus de gemiddelde gemeten absorptie van standaard nul).
3.2 Construeer een standaardcurve, met behulp van computersoftware die in staat is een logische curve met vier
parameters te genereren, door de concentratie in ng/ml (ppb) op de x-as en de gemeten absorptie van elke
bijbehorende standaard op de y-as uit te zetten. Een polynoom (kwadratisch) van de tweede orde of andere curves
kunnen ook worden gebruikt; ze zullen echter een minder nauwkeurig beeld kunnen vormen van de gegevens.
(Nederlands)
NL
8
3.3 Bereken de monsterconcentraties van de standaardcurve; de eenheid van het resultaat is ng/ml (ppb).
Vermenigvuldig daarna de monsterverdunningsfactor om de concentratie van het originele monster te verkrijgen.
Bijvoorbeeld, als de totale verdunning van het monster 1/100 is en de monsterconcentratie van de standaardcurve
is 200 ng/ml (ppb), dan is de uiteindelijke monsterconcentratie 200 ng/ml x 100 = 20.000 ng/ml (ppb), wat gelijk
is aan 20 g/ml (ppm).
Minimale prestatiekenmerken
a. De analytische detectiegrens is 9,7 ng/ml (ppb)
De detectiegrens wordt gedenieerd als de laagste concentratie van het allergeen in een testmonster dat kan
worden onderscheiden van een blanco monster op een speciek waarschijnlijkheidsniveau
3
. Het wordt bepaald
door drie standaarddeviaties op te tellen bij de gemiddelde optische dichtheidswaarde van achtenveertig
herhalingen van standaard nul en de bijbehorende concentratie te berekenen.
b. De kwanticatielimiet is 2 ppm
De kwanticatielimiet wordt gedenieerd als het laagste niveau van het allergeen in een testmonster dat
redelijkerwijs gekwanticeerd kan worden op een gespeciceerd precisieniveau
3
.
Precisie
Precisie intratest Gemiddeld %CV = <10% N=12
Precisie intertest Gemiddeld %CV = <10% N=12
Speciciteit en kruislingse reactiviteit
Deze test herkent kokosproteïne en is getest met diverse monsters op kruislingse reactiviteit (Tabel 3.)
Tabel 3. Kruislingse reactiviteit van de 3M Kokos Proteïne ELISA test.
Matrixmonster % kruislingse reactiviteit
Amandelmeel <1%
Amandelmelk <1%
BLG <1%
Rundercaseïne <1%
Rundermelk <1%
Paranoot <1%
Boekweitmeel <1%
Cashew <1%
Selderij <1%
Kikkererwt <1%
Kokosmeel (+)
Kokosmelk (+)
Maismeel <1%
Parvalbumine uit vis <1%
Hazelnoot <1%
Limaboon <1%
Macadamianoot <1%
Mosterdzaad <1%
Ovomucoïde <1%
Erwtenextract <1%
Pindameel <1%
Pecannoot <1%
Pijnboompit <1%
Pistachenotenmeel <1%
Pompoenpit <1%

Documenttranscriptie

NL (Nederlands) 3 Datum van uitgifte: 2017-11 Productinstructies Kokos Proteïne ELISA test Enzymgekoppeld immunosorbent-assay (ELISA) voor de kwantitatieve analyse van kokosproteïne. Productbeschrijving en beoogd gebruik De 3M™ Kokos Proteïne ELISA test is bedoeld voor de detectie van kokosproteïne in CIP-water ('clean-in-place') van de laatste spoeling, omgevingsmonsters, voedingsingrediënten en verwerkte voedingsmiddelen. De 3M Kokos Proteïne ELISA test maakt gebruik van een sandwich-ELISA. De aanwezige kokosproteïne in het monster reageert met het anti-kokos antilichaam, dat geadsorbeerd is aan het oppervlak van wells in een polystyreen microtiterplaat. Nadat ongebonden proteïne is verwijderd door middel van wassen, worden anti-kokos antilichamen geconjugeerd met mierikswortelperoxidase (HRP – 'horseradish peroxidase') toegevoegd. Deze met enzymen gelabelde antilichamen vormen complexen met de eerder gebonden kokosproteïne. Na een tweede wasstap wordt het enzym dat is gebonden aan het immunosorbent gedetecteerd door middel van het toevoegen van een chromogene substraat, 3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine (TMB). De kleurontwikkeling van deze enzymatische reactie staat in direct verband met de concentratie van kokosproteïne in het geteste monster; daarom is de absorptie, bij 450 nm, een meting voor de concentratie van kokosproteïne in het testmonster. De kwantiteit van kokosproteïne in het testmonster kan geëxtrapoleerd worden van de standaardcurve die is samengesteld met behulp van standaarden van bekende concentraties en is aangepast aan de verdunning van het monster. De 3M Kokos Proteïne ELISA test is bedoeld voor gebruik in een laboratoriumomgeving door professionals geschoold in laboratoriumtechnieken. 3M heeft het gebruik van dit product niet gedocumenteerd in andere sectoren dan de voedings- of dranksector. 3M heeft dit product bijvoorbeeld niet gedocumenteerd voor farmaceutische, cosmetische, klinische of veterinaire monsters. De 3M Kokos Proteïne ELISA test is niet getest met alle voorkomende voedingsproducten, voedingsprocessen en testprotocollen. De 3M Kokos Proteïne ELISA test bevat 96 wells, die zijn beschreven in Tabel 1. Tabel 1. Setonderdelen Artikel Identificatie Voorbereiding (raadpleeg het onderdeel 'De reagentia voorbereiden' voor details) Opslag Stabiliteit 3M™ Kokos Proteïne ELISA wells Een foliezakje met een plaat van 96 verwijderbare wells gecoat met antilichaam. Klaar voor gebruik. 2-8 °C in verzegelde foliezak met droogmiddel. Hersluit de foliezak met de ongebruikte wells en droogmiddel. Bewaar de set bij 2-8 °C om de stabiliteit te behouden tot de vervaldatum. 3M™ Kokos HRPconjugaat (10X) Een ampul met 1,5 ml met 10X antilichamen geconjugeerd met HRP (mierikswortelperoxidase) (10X). Verdun voorafgaand 2-8 °C in het aan gebruik donker. onmiddellijk 1/10 om een 1X werkzame oplossing te maken. Het 10X conjugaat is stabiel tot de vervaldatum van de set. Raadpleeg het onderdeel 'ELISAprocedure' voor de standaard voorbereiding. 3M Kokos Proteïne Standaardconcentraat is stabiel tot de vervaldatum van de set. 3M™ Kokos Proteïne Een ampul met Standaardconcentraat kokosproteïne waarvan de concentratie bekend is. 1 2-8 °C. Niet invriezen. NL (Nederlands) 3M™ Verdunningsmiddel (5X) Eén flesje van 50 ml met 5X verdunningsmiddel. Verdun voorafgaand 2-8 °C aan gebruik onmiddellijk 1/5 om een 1X werkzame oplossing te maken. De 5X 3M Verdunningsoplossing is stabiel tot de vervaldatum van de set. 3M™ Wasoplossing (20X) Eén flesje van 50 ml met 20X wasoplossing. Verdun 1/20 om een 1X werkzame oplossing te maken. 2-8 °C voor zowel 1X werkzame oplossing als 20X wasoplossingsconcentraat. De 20X 3M Wasoplossing is stabiel tot de vervaldatum van de set. De 1X wasoplossing is na bereiding minimaal een week stabiel. 3M™ Extractiebuffer E26 (4X) Eén flesje van 120 ml met 4X extractiebuffer. Verdun 1/4 om een 1X werkzame oplossing te maken. De werkzame oplossing moet voorafgaand aan gebruik worden verhit tot 50-60 °C. 2-8 °C voor 1X werkzame oplossing en 4X 3M Extractiebufferconcentraat. De 1X extractiebuffer en 4X 3M Extractiebuffer zijn stabiel tot de vervaldatum van de set. 3M™ Chromogene substraatoplossing Eén flesje van 12 ml met 3,3’,5,5’tetramethylbenzidine (TMB). Klaar voor gebruik. 2-8 °C in het donker. Bescherm tegen licht. De 3M Chromogene substraatoplossing is stabiel tot de vervaldatum van de set. 3M™ Stopoplossing Eén flesje van 12 ml met 0,3 M zwavelzuur. Klaar voor gebruik. 2-8 °C De 3M Stopoplossing is stabiel tot de vervaldatum van de set. Materialen die niet in de set worden geleverd: • • • • • • • • • • precisiepipetten en pipettips om 10 tot 100 μl te verzamelen testbuisjes was-/aspiratiemachine voor de microtiterplaat gedestilleerd of gedeïoniseerd water aflezer voor de microtiterplaat diverse laboratoriumproducten voor de bereiding van reagentia en bufferoplossingen timer vortexmenger schudwaterbad of schudincubator orbitale schudmachine Veiligheid De gebruiker dient alle veiligheidsinformatie in de instructies voor de 3M Kokos Proteïne ELISA test te lezen, te begrijpen en op te volgen. Bewaar de veiligheidsinstructies om deze later te kunnen raadplegen. WAARSCHUWING: geeft een gevaarlijke situatie aan die, indien deze niet wordt vermeden, de dood, ernstig letsel en/of materiële schade tot gevolg kan hebben. OPMERKING: geeft een mogelijk gevaarlijke situatie aan die, als ze niet vermeden wordt, kan resulteren in materiële schade. 2 NL (Nederlands) W WAARSCHUWING Om de risico's van blootstelling aan chemicaliën te verminderen: • Afvoeren volgens de huidige plaatselijke/regionale/nationale/industriële standaarden en regelgevingen. • De gebruiker moet zijn personeel scholen in de huidige juiste testtechnieken; bijvoorbeeld, Goede laboratoriumpraktijken1 of ISO/IEC 170252. • Volg altijd de standaard veiligheidsvoorschriften voor laboratoria op, waaronder het dragen van toepasselijke beschermende kleding en oogbescherming bij het hanteren van reagentia. • Vermijd contact van de huid met de 3M Stopoplossing, raadpleeg het veiligheidsinformatieblad voor aanvullende informatie. Om de risico's te beperken die verbonden zijn aan foutieve negatieve resultaten die kunnen leiden tot de vrijgave van besmet product: • Bewaar de 3M Kokos Proteïne ELISA test zoals aangegeven wordt op de verpakking en in de productinstructies. • Gebruik de 3M Kokos Proteïne ELISA test voor voedings- en omgevingsmonsters die intern of door een derde partij zijn gevalideerd. • Volg het protocol en voer de testen exact uit zoals aangegeven in de productinstructies. • 3M heeft het gebruik van de 3M Kokos Proteïne ELISA test niet gedocumenteerd in andere sectoren dan de voedings- en drankensector. 3M heeft dit product bijvoorbeeld niet gedocumenteerd voor farmaceutische, cosmetische, klinische of veterinaire monsters. Om de risico’s van onjuiste resultaten die tot de vrijlating van besmet product leiden te verminderen, doet u het volgende: • Gebruik de 3M Kokos Proteïne ELISA test altijd vóór de vervaldatum. • Bereid de werkzame oplossingen met behulp van de geconcentreerde reagentia van de 3M Kokos Proteïne ELISA test altijd bij een temperatuur van 20-25 °C. • Vries het 3M Kokos Proteïne Standaardconcentraat niet in. • Gebruik de chromogene substraatoplossing niet als deze blauw kleurt. Volg de Goede laboratoriumpraktijken1 om kruisbesmetting van de 3M Chromogene substraatoplossing te voorkomen. OPMERKING Beperk de risico's van onjuiste resultaten op de volgende wijze: • De stabiliteit van de monsters na extractie is niet geëvalueerd. De ELISA-procedure moet direct na extractie van het monster worden uitgevoerd. • Hanteer de 3M Kokos Proteïne Standaarden volgens Goede laboratoriumpraktijken1 om kruisbesmetting van monsters te voorkomen. Raadpleeg het veiligheidsinformatieblad voor aanvullende informatie. Voor informatie over documentatie van productprestaties kunt u onze website op www.3M.com/foodsafety bezoeken of contact opnemen met uw plaatselijke 3M-vertegenwoordiger of -distributeur. Verantwoordelijkheid van de gebruiker Gebruikers worden geacht zich vertrouwd te maken met de productinstructies en -informatie. Bezoek onze website www.3M.com/foodsafety of neem contact op met uw plaatselijke 3M-vertegenwoordiger of -distributeur voor meer informatie. Zoals met alle testmethodes die worden gebruikt voor voedselanalyse, kan de testmatrix invloed hebben op de resultaten. Bij het kiezen van een testmethode is het belangrijk om te erkennen dat externe factoren zoals proefmethoden, testprotocollen, proefvoorbereiding en -behandeling en laboratoriumtechniek invloed kunnen hebben op de resultaten. Het voedselmonster kan de resultaten beïnvloeden. Het is de verantwoordelijkheid van de gebruiker dat hij/zij voldoende monsters beoordeelt om zich ervan te verzekeren dat de gekozen testmethode voldoet aan de criteria van de gebruiker. Het is ook de verantwoordelijkheid van de gebruiker om te bepalen of testmethoden en resultaten aan de vereisten van klanten en leveranciers voldoen. Zoals bij elke testmethode, garanderen de verkregen resultaten van het gebruik van een 3M Food Safety-product de kwaliteit van de geteste matrices of processen niet. 3 NL (Nederlands) Garantiebeperkingen/Beperkte Oplossing BEHALVE WAAR UITDRUKKELIJK VERMELD IN EEN BEPERKTE GARANTIEBEPALING VAN EEN INDIVIDUELE PRODUCTVERPAKKING, WIJST 3M ALLE UITDRUKKELIJKE EN IMPLICIETE GARANTIES AF, MET INBEGRIP VAN, MAAR NIET BEPERKT TOT, ELKE GARANTIE MET BETREKKING TOT DE GOEDE WERKING EN DE GESCHIKTHEID VOOR EEN BEPAALD DOEL. Als een 3M Voedselveiligheidproduct gebrekkig is, zal 3M of zijn gevolmachtigde distributeur naar eigen keuze het product vervangen of de aankoopprijs van het product terugbetalen. Dit is het enige rechtsmiddel waarover u beschikt. Indien u vermoedt dat een product gebrekkig is, dan moet u 3M daarvan binnen de 60 dagen na het vaststellen op de hoogte brengen. Bel onze klantenservice (+31-71-5450386) of uw erkende vertegenwoordiger voor 3M Voedselveiligheid, die u autorisatie voor het retourneren van de goederen zal geven. Beperking van 3M-aansprakelijkheid 3M IS NIET AANSPRAKELIJK VOOR ENIG VERLIES OF SCHADE, ONGEACHT OF HET GAAT OM RECHTSTREEKSE, ONRECHTSTREEKSE, SPECIALE, INCIDENTELE OF GEVOLGSCHADE, MET INBEGRIP VAN, MAAR NIET BEPERKT TOT WINSTDERVING. In geen geval zal de wettelijke aansprakelijkheid van 3M onder om het even welke juridische theorie de aankoopprijs van het zogenaamd gebrekkige product overschrijden. Opslag en afvalverwerking Bewaar de inhoud van de 3M Kokos Proteïne ELISA test bij 2-8 °C. Niet invriezen. Bewaar verdunde werkzame oplossingen zoals beschreven in Tabel 1. De onderdelen van de 3M Kokos Proteïne ELISA test mogen niet worden gebruikt na de vervaldatum. De vervaldatum en het partijnummer zijn terug te vinden op het etiket aan de buitenzijde van de doos. Afvoeren volgens de huidige plaatselijke/regionale/nationale/industriële standaarden en regelgevingen. Gebruiksaanwijzingen Volg alle instructies zorgvuldig op. Het niet opvolgen van de instructies kan onnauwkeurige resultaten tot gevolg hebben. De reagentia voorbereiden Laat alle reagentia voorafgaand aan gebruik op omgevingstemperatuur komen (20-25 °C). Gebruik schone laboratoriumproducten om werkzame oplossingen te verdunnen en te bewaren. a. 3M Extractiebuffer Om de 1X extractiebuffer te bereiden, voegt u één deel van de 3M Extractiebuffer (4X) toe aan drie delen gedeïoniseerd of gedestilleerd water om te verdunnen. Verwarm voorafgaand aan gebruik de extractiebuffer (1X) voor tot 50-60 °C in een waterbad of schudincubator. Elk monster vereist 4,5 ml van de 1X extractiebuffer. b. 3M Verdunningsoplossing Om de 1X verdunningsoplossing te bereiden, voegt u één deel van het 3M Verdunningsmiddel (5X) toe aan vier delen gedeïoniseerd of gedestilleerd water. Elk monster vereist in totaal 4,5 ml van het 1X verdunningsmiddel. c. 3M Wasoplossing Om de 1X wasoplossing te bereiden, voegt u één deel van het 3M Wasoplossing (20X) toe aan 19 delen gedeïoniseerd of gedestilleerd water. Elke 3M ELISA well vereist ongeveer 2,5 ml 1X wasoplossing. Opmerking: Wanneer de 3M Wasoplossing (20X) wordt opgeslagen bij 2-8 °C is het mogelijk dat zich kristallen vormen in de oplossing. Om kristallen op te lossen verwarmt u de 3M Wasoplossing (20X) tot 30-35 °C in een waterbad of incubator voorafgaand aan de bereiding van de wasoplossing (1X). d. 3M Kokos HRP-conjugaat Om het 1X kokos HRP-conjugaat te bereiden, voegt u één deel van het 3M Kokos HRP-conjugaat (10X) toe aan 9 delen van de 1X verdunningsoplossing. Bereid deze oplossing onmiddellijk voor gebruik. Elke 3M ELISA well vereist 100 μl van het 1X kokos HRP-conjugaat. Voorbereiding monster Opmerking: Alle monsters moeten worden geëxtraheerd met 1X extractiebuffer voorverwarmd tot 50-60 °C. 1.1 Bereid het monster voor proteïne-extractie in een schoon testbuisje of wegwerpbuisje zoals beschreven in Tabel 2. 4 NL (Nederlands) Tabel 2. Voorbereiding monster Monstermatrix Monstergrootte Verdunning (1/10) Vaste voedingsmiddelen 0,5 ± 0,02 g Voeg 4,5 ± 0,09 ml voorverwarmde 1X extractiebuffer toe Vloeibare voedingsmiddelen 0,5 ± 0,01 ml Voeg 4,5 ± 0,09 ml voorverwarmde 1X extractiebuffer toe CIP-water ('clean-in-place') van de laatste spoeling 0,5 ± 0,01 ml Voeg 4,5 ± 0,09 ml voorverwarmde 1X extractiebuffer toe Vaste stof Vloeistof 1.2 Incubeer de monsters 25 ± 1 minuut lang in een schudwaterbad of schudincubator bij 50-60 °C. Een andere optie is de monsters in een waterbad of incubator van 50-60 °C plaatsen en elke 5 minuten gedurende 1 minuut handmatig schudden. 1.3 Centrifugeer de monsters 20 tot 30 seconden bij 5000-7000 rpm (3000 x g) na incubatie om deeltjes te pelletiseren of laat de monsters 5 minuten in een testbuisrek bezinken. 1.4 Verzamel 100 μl vanuit de middelste (waterige) laag en voeg dit toe aan 900 μl verdunningsoplossing (1X). Meng de oplossing goed door middel van schudden of mengen in de vortexmenger. (Dit correspondeert met een 1/100 verdunning van het originele monster.) 50-60 °C 00:25:00 of 5 NL (Nederlands) 00:05:00 of 3000 g / 00:00:30 ELISA-procedure 2.1 Verwijder één 3M ELISA well per monster en/of standaard en plaats de wells in de daarvoor geschikte houder. Plaats de ongebruikte 3M ELISA wells terug in de foliezak, hersluit de zak en plaats deze terug in opslag bij 2-8 °C. 2.2 Bereid met behulp van het 3M Kokos Proteïne Standaardconcentraat een set van vier standaarden verdund in verdunningsoplossing (1X). Nummer standaard Concentratie standaard (ng/ml) Volume van standaard toegevoegd aan 1X verdunningsmiddel Volume van 1X verdunningsoplossing 4 540 10 μl 3M Kokos Proteïne Standaardconcentraat 990 μl 3 180 200 μl van standaard nummer 4 400 μl 2 60 200 μl van standaard nummer 3 400 μl 1 20 200 μl van standaard nummer 2 400 μl 0 0 0 400 μl 2.3 Pipetteer 100 μl van elke standaard in 3M ELISA wells. • • • • • Standaard 0 (1X Verdunningsoplossing) Standaard 1 (20 ng/ml) ppb Standaard 2 (60 ng/ml) ppb Standaard 3 (180 ng/ml) ppb Standaard 4 (540 ng/ml) ppb 2.4 Pipetteer 100 μl van het monster dat is geëxtraheerd in stap 1.4 in een 3M ELISA well. 2.5 Incubeer 3M ELISA wells 30 ± 2 minuten in een orbitale schudmachine ingesteld op 400 rpm op omgevingstemperatuur (20-25 °C). Voorkom verdamping door de wells afgedekt en horizontaal te houden tijdens deze stap. 2.6 Aspireer de inhoud van de 3M ELISA wells na de incubatie. 2.7 Vul elke 3M ELISA well volledig met 1X wasoplossing en aspireer deze daarna. Indien het wassen handmatig wordt uitgevoerd, draai de plaat om en giet/schud de inhoud leeg in een afvalcontainer. Sla de wells krachtig op absorberend papier om resterende wasoplossing te verwijderen. Herhaal deze stap drie keer om in totaal vier wasbeurten te voltooien. 2.8 Pipetteer 100 μl 1X Kokos HRP-conjugaat in elke 3M ELISA well. Incubeer 10 ± 2 minuten in een orbitale schudmachine ingesteld op 400 rpm op omgevingstemperatuur. Houd de plaat tijdens deze stap afgedekt in het donker en horizontaal. 2.9 Herhaal stappen 2.6 en 2.7 om in totaal vier wasbeurten te voltooien met wasoplossing (1X). 2.10 Pipetteer 100 μl 3M Chromogene substraatoplossing (TMB) in elke 3M ELISA well. 2.11 Incubeer 10 minuten in een orbitale schudmachine ingesteld op 400 rpm op omgevingstemperatuur. Houd de plaat tijdens deze stap afgedekt in het donker en horizontaal. 2.12 Voeg na de incubatie 100 μl 3M Stopoplossing toe aan elke 3M ELISA well en bepaal de absorptie (bij 450 nm) binnen 30 minuten. 6 NL (Nederlands) 00:30:00/omgevingstemperatuur 00:10:00/omgevingstemperatuur 00:10:00/omgevingstemperatuur Resultatenanalyse 3.1 Trek de gemiddelde achtergrondwaarde van elk monster af (de gemiddelde gemeten absorptie van het monster minus de gemiddelde gemeten absorptie van standaard nul). 3.2 Construeer een standaardcurve, met behulp van computersoftware die in staat is een logische curve met vier parameters te genereren, door de concentratie in ng/ml (ppb) op de x-as en de gemeten absorptie van elke bijbehorende standaard op de y-as uit te zetten. Een polynoom (kwadratisch) van de tweede orde of andere curves kunnen ook worden gebruikt; ze zullen echter een minder nauwkeurig beeld kunnen vormen van de gegevens. 7 NL (Nederlands) 3.3 Bereken de monsterconcentraties van de standaardcurve; de eenheid van het resultaat is ng/ml (ppb). Vermenigvuldig daarna de monsterverdunningsfactor om de concentratie van het originele monster te verkrijgen. Bijvoorbeeld, als de totale verdunning van het monster 1/100 is en de monsterconcentratie van de standaardcurve is 200 ng/ml (ppb), dan is de uiteindelijke monsterconcentratie 200 ng/ml x 100 = 20.000 ng/ml (ppb), wat gelijk is aan 20 μg/ml (ppm). Minimale prestatiekenmerken a. De analytische detectiegrens is 9,7 ng/ml (ppb) De detectiegrens wordt gedefinieerd als de laagste concentratie van het allergeen in een testmonster dat kan worden onderscheiden van een blanco monster op een specifiek waarschijnlijkheidsniveau3. Het wordt bepaald door drie standaarddeviaties op te tellen bij de gemiddelde optische dichtheidswaarde van achtenveertig herhalingen van standaard nul en de bijbehorende concentratie te berekenen. b. De kwantificatielimiet is 2 ppm De kwantificatielimiet wordt gedefinieerd als het laagste niveau van het allergeen in een testmonster dat redelijkerwijs gekwantificeerd kan worden op een gespecificeerd precisieniveau3. Precisie Precisie intratest Gemiddeld %CV = <10% N=12 Precisie intertest Gemiddeld %CV = <10% N=12 Specificiteit en kruislingse reactiviteit Deze test herkent kokosproteïne en is getest met diverse monsters op kruislingse reactiviteit (Tabel 3.) Tabel 3. Kruislingse reactiviteit van de 3M Kokos Proteïne ELISA test. Matrixmonster % kruislingse reactiviteit Amandelmeel <1% Amandelmelk <1% BLG <1% Rundercaseïne <1% Rundermelk <1% Paranoot <1% Boekweitmeel <1% Cashew <1% Selderij <1% Kikkererwt <1% Kokosmeel (+) Kokosmelk (+) Maismeel <1% Parvalbumine uit vis <1% Hazelnoot <1% Limaboon <1% Macadamianoot <1% Mosterdzaad <1% Ovomucoïde <1% Erwtenextract <1% Pindameel <1% Pecannoot <1% Pijnboompit <1% Pistachenotenmeel <1% Pompoenpit <1% 8
  • Page 1 1
  • Page 2 2
  • Page 3 3
  • Page 4 4
  • Page 5 5
  • Page 6 6
  • Page 7 7
  • Page 8 8
  • Page 9 9
  • Page 10 10
  • Page 11 11
  • Page 12 12
  • Page 13 13
  • Page 14 14
  • Page 15 15
  • Page 16 16
  • Page 17 17
  • Page 18 18
  • Page 19 19
  • Page 20 20
  • Page 21 21
  • Page 22 22
  • Page 23 23
  • Page 24 24
  • Page 25 25
  • Page 26 26
  • Page 27 27
  • Page 28 28
  • Page 29 29
  • Page 30 30
  • Page 31 31
  • Page 32 32
  • Page 33 33
  • Page 34 34
  • Page 35 35
  • Page 36 36
  • Page 37 37
  • Page 38 38
  • Page 39 39
  • Page 40 40
  • Page 41 41
  • Page 42 42
  • Page 43 43
  • Page 44 44
  • Page 45 45
  • Page 46 46
  • Page 47 47
  • Page 48 48
  • Page 49 49
  • Page 50 50
  • Page 51 51
  • Page 52 52
  • Page 53 53
  • Page 54 54
  • Page 55 55
  • Page 56 56
  • Page 57 57
  • Page 58 58
  • Page 59 59
  • Page 60 60
  • Page 61 61
  • Page 62 62
  • Page 63 63
  • Page 64 64
  • Page 65 65
  • Page 66 66
  • Page 67 67
  • Page 68 68
  • Page 69 69
  • Page 70 70
  • Page 71 71
  • Page 72 72
  • Page 73 73
  • Page 74 74
  • Page 75 75
  • Page 76 76
  • Page 77 77
  • Page 78 78
  • Page 79 79
  • Page 80 80
  • Page 81 81
  • Page 82 82
  • Page 83 83
  • Page 84 84
  • Page 85 85
  • Page 86 86
  • Page 87 87
  • Page 88 88
  • Page 89 89
  • Page 90 90
  • Page 91 91
  • Page 92 92
  • Page 93 93
  • Page 94 94
  • Page 95 95
  • Page 96 96
  • Page 97 97
  • Page 98 98
  • Page 99 99
  • Page 100 100
  • Page 101 101
  • Page 102 102
  • Page 103 103
  • Page 104 104
  • Page 105 105
  • Page 106 106
  • Page 107 107
  • Page 108 108
  • Page 109 109
  • Page 110 110
  • Page 111 111
  • Page 112 112
  • Page 113 113
  • Page 114 114
  • Page 115 115
  • Page 116 116
  • Page 117 117
  • Page 118 118
  • Page 119 119
  • Page 120 120
  • Page 121 121
  • Page 122 122
  • Page 123 123
  • Page 124 124
  • Page 125 125
  • Page 126 126
  • Page 127 127
  • Page 128 128
  • Page 129 129
  • Page 130 130
  • Page 131 131
  • Page 132 132
  • Page 133 133
  • Page 134 134
  • Page 135 135
  • Page 136 136
  • Page 137 137
  • Page 138 138
  • Page 139 139
  • Page 140 140
  • Page 141 141
  • Page 142 142
  • Page 143 143
  • Page 144 144
  • Page 145 145
  • Page 146 146
  • Page 147 147
  • Page 148 148
  • Page 149 149
  • Page 150 150
  • Page 151 151
  • Page 152 152
  • Page 153 153
  • Page 154 154
  • Page 155 155
  • Page 156 156
  • Page 157 157
  • Page 158 158
  • Page 159 159
  • Page 160 160
  • Page 161 161
  • Page 162 162
  • Page 163 163
  • Page 164 164
  • Page 165 165
  • Page 166 166
  • Page 167 167
  • Page 168 168
  • Page 169 169
  • Page 170 170
  • Page 171 171
  • Page 172 172
  • Page 173 173
  • Page 174 174
  • Page 175 175
  • Page 176 176
  • Page 177 177
  • Page 178 178
  • Page 179 179
  • Page 180 180
  • Page 181 181
  • Page 182 182
  • Page 183 183
  • Page 184 184
  • Page 185 185
  • Page 186 186
  • Page 187 187
  • Page 188 188
  • Page 189 189
  • Page 190 190
  • Page 191 191
  • Page 192 192
  • Page 193 193
  • Page 194 194
  • Page 195 195
  • Page 196 196
  • Page 197 197
  • Page 198 198
  • Page 199 199
  • Page 200 200
  • Page 201 201

3M Allergen Protein ELISA Kit Handleiding

Type
Handleiding